[quote user="湘湘"]11.16

今天做DNA回收,做得不错,明天抽质粒.
心情不好,所以也不想写什么.大哭一场,对自己笑一下.

明天还得继续.生活就是这样,你不想干,也得干!
对自己说:有信心,要努力,要坚持![/quote]

 

湘湘，日期写错了哦。^_^

 

生活没有什么好与不好，只有快乐与不快乐、开心与不开心。

 

我们的努力都是为了明天会更好、更快乐，为啥不从现在开始呢？

 

11.19 这两天没有写东西,不是没有做实验,而是很忙,很累,没有时间. 今天总算把质粒酶切好了,呵呵,很兴奋!因为前面总是没有做出来,看来还是和我的质粒有关.酶切回收就连接了,明天再转化,就这样. 今天排练,到我的时候麦克风都没有声音,唱得郁闷哦,呵呵,下次再来吧

湘湘,你真写出了很多green hand 的切身感受啊! 文笔不错. 加油哦!

11.21 这两天还是一样的忙,回到宿舍就只想睡觉了.昨天连接产物转化,只有一种载体转化出来,另外一种都没有出来.不知道怎么回事.更奇怪的事,我今天做了2种感受态细胞----DH5σ,BL21.同时做的,居然DH5σ都没有摇出菌来,BL21也只有大瓶摇 出来了,小瓶没有.真不知道怎么回事.

11.22 今天做了菌液PCR,昨天在PCR专栏看了,发现不要煮沸也可以P出来.一边PCR一边抽质粒.老板说先P出来再抽,,不管他了,反正试剂是配的,不用也浪费.先抽了再说!(第一次和老板对着干!) 抽质粒没有想到想偷点懒,结果自己还是掺了,一个人做到8点多才做完转化.用了我自己做的表达菌和师姐做的,对比一下.希望明天有个好结果. 现在心里有点怕怕的,很怕自己的做不出来.一定要克服这个心理障碍才行啊!

11.23 今天重组质粒转化到表达菌,有一半的长得不错,另一半就不怎么样了.有一个问题很困惑,到底涂板的时候可不可以把盖子打开那么涂呢?实际上我是那么干的.但微生物专业的同学却说这样会污染的,可是我按他的方法涂板,每次菌都长得很少,真是奇怪了!他说我是把菌给烫死了,晕!明天做诱导表达,还没有做过呢,师兄都考公务员去了,老板心情又不好,只好自己一个人摸了. PS:今天排练又不好,音响又出问题,哎,希望正式比赛那天不会这样! 主席发了10张票给我,突然才发现我都不认识什么本科生,郁闷啊,都发不出去哦!---------没想到一个贴心的师弟刚给我短信要给我加油,呵呵,票可以送出去了!

湘湘，你的实验已经有进展了，加油！涂板的时候，可以把盖子打半开，小心操作就不会污染的。涂之前注意涂布器温度不要太高，否则会把菌烫死的。

xiangxiang,你一定要拿个奖哦,大伙等着你好消息呢.

怕烫死菌的话，涂的时候可以把涂布器在平板的盖子内侧或没有菌液的培养基靠一下降温。
一般标准操作是不全开盖子的，单手将盖子打开60度左右就可以涂了，涂不匀（注意你用的菌液量）的话要转动平板的底部，就和划线分离一样。但是只要操作好，开不开都不会染菌，要是以后要当老师，还是别开盖子了，呵呵

11.25 首先谢谢大家给我的解答啊! 实验是差不多了,昨天做了诱导表达.出现一个很奇怪的现象:同时做的一批,吸100u的菌液培养2小时.pet载体的2小时就长很多了，可prestB的确都没有什么，结果培养了4小时才出现云雾状。开始时以为是加菌液时没有摇匀，可后来我又做了一批空质粒的，还是一样的，真是很奇怪啊 ！ 今天跑SDS电泳，从来没有做过，真是有点心里没底。不过还是跑出来了。奇怪的是，我看的资料，有的说浓缩胶要120v，有的说100v，有的是80v，但分离胶就差别更大了，有的说120v，有的说60v。真让我心里怕怕的。结果我还是跑的80v和120v。到底怎么样好呢？请高手解答下吧！ 明天就比赛了，真激动！