求助:Thp-1细胞的培养
我们实验室从上海买了一株Thp-1细胞,来的时候好好的,可在我室只待了一天,就半死不活的,问了上海,说用进口的胎牛血清,可一时又找不到,就用了三种不同的血清来做对照,而且放在了培养板里了,可还是半死不活的,难道血清的差别就那么大吗?不会是别的原因吗?我们其他的细胞都好好的!CO2会不会有问题,要用高纯的吗?求助怎么办!这柱细胞我已经买了两次了,再养不好,老板要杀了我了:'( 我没有培养过Thp-1细胞,但是如果如你所说”来的时候好好的,可在我室只待了一天,就半死不活的”,我严重怀疑培养基和血清的问题
我认为你应该从以下几点找原因
1。如果是粉末的培养基,你保证配制时超纯水的质量吗?配制方法正确吗?
2。PH有没有变化?
3。血清的问题也是关键,有些国产血清的确没有进口的好。
4。最好是它原来吃惯了什么牌子和类型的培养基和血清,你就得喂它什么。不要急于更改。
5。二氧化碳培养箱没有问题吧? 根据你的情况分析如下: 肯定培养环境改变了,所以出现这种情况.
其实我也遇到过这样的情况,但我具体不知道半死不活是什么概念?
看细胞状态,应该从这几方面来看,但主要看生长速度.
但我个人估计,换过几次液后,细胞会转好. 我也在养THP-1,我用20%的FBS生长速度很快。但是不知道什么原因,总长菌,害我实验都做不了。
有的文献报道THP-1使用heat inactivated的FBS,正准别尝试。
哎~~THP-1太难养了 THP-1细胞要长起来确实很快,培养基很快变黄,有师兄说细胞疯长可能是因为细胞时间太长,楼上的师兄是不是血清浓度太高了,我的10%都长很快,师兄的估计更快了,想请问师兄我的THP-1这两天感觉多形细胞增多,有何问题没有?是不是细胞活性有问题了!!谢谢!!
THP-1培养配方
请问各位:有没有做过THP-1培养,用的是什么配方.我想请教一下ATCC配方中有加2-巯基乙醇,请问它是什么用的,能不能不加.2-巯基乙醇为剧毒物质,操作好象很恐怖啊
谢谢
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